固定化细胞工业化生产L-苹果酸

（1）固定化细胞的酶活力

每克湿菌体，经卡拉胶固定后，可得6g固定化细胞，加入15ml由1M富马酸钠内含0.3%的胆酸组成的活化液，在37℃下保温20-24h进行活化，其目的激活富马酸酶的活力和抑制琥珀酸副产物的产生。活化后的固定化细胞颗粒滤除清液，再经0.1MKCL洗涤2-3次，最后用无离子水洗至无胆酸为止，装柱待用。

（2）固定化细胞酶转化

以Fu代表富马酸根，以Ma代表苹果酸根，则转化反应如下式：

   Na₂Fu=Na₂Ma+Na₂Fu

    ㈠反应底物配制。将工业级富马酸加NaOH配制成1.1-1.3M的富马酸钠溶液，PH为6.9-7.2，保温37-40℃，然后将溶液上柱转化。

    ㈡上柱酶转化。将底物溶液以恒速流过装有固定化细胞反应柱，底物通过富马酸转化L-苹果酸。通过调节产物的浓度来控制流速，流出液中的L-苹果酸钠浓度以0.85M为标准，大于此值可适当加大流速，小于此速则反之。流出液中实际上大部分是已转化好的L-苹果酸钠和小部分未转化的富马酸钠的混合液，在整个反应过程中底物和柱的温度始终保持在37-40℃，这是该酶的最适反应温度。