蛋白质多肽激素的提取1

杨酸试液检查，应不发生沉淀），若不完全再次用皂土浆吸附，两次皂土浆沉淀合并。皂土用1%醋酸溶液解吸，总量为5l，分4次加，分别为1.6l、1.4l、1.2l、0.8l，每次加热到80℃时加入0.5%三氯叔丁醇，然后加热到95℃，立即速冷到25℃以下，离心或过滤，合并4批滤液，送样化验效价及加压素限度。②滤液预先取样送测效价及加压素限度，得出结果，然后将滤液用醋酸调节pH值，按每100ml加入1～3ml10%皂土浆（皂土浆用量根据加压素的含量可酌情增减），搅拌吸附25min，离心，上清液再用布氏漏斗过滤，澄清滤液送样化验效价及加压素限度。

酸丙酮法制备促皮质素

工艺过程：

    原料处理  猪宰杀后将垂体完整取出，投入丙酮中，浸泡24h后再更换新的丙酮，共3次以上，至垂体变硬为止。然后细心剥离，将前后叶分开，分别投入丙酮中贮藏备用。使用前取出前叶，置瓷盘中于干燥柜中干燥，然后磨粉，过40目筛，水分应低于6%。

    提取  前叶粉1kg用少量丙酮润湿后调与糊状，加入丙酮总量为8400ml，在搅拌下加入1mol/L盐酸3600ml，加热使液温达50℃，保持30min，速冷到30℃以下，过滤（滤液用冰冷却到4℃左右），滤渣再加入2800ml丙酮和0.1mol/L盐酸1200ml，同样操作条件再提取一次。过滤，合并2次滤液，温度达到4℃左右时过滤数次，直至澄清为止。

    沉淀、干燥  量滤液体积加入0.3%氧化溶液，搅匀，加8～10倍体积的丙酮，再搅10min，静置5min后虹吸再酮清液，沉淀用3号垂熔玻璃漏斗过滤，滤干后再用工业丙酮洗3次，用化学纯丙酮洗两次，再用无水乙醚洗两次，真空干燥，即得成品。

交联羟甲基纤维素（CMC）精制法

工艺过程：

    提取  称取前叶干粉1kg，加入预热到50℃的0.5mol/L醋酸20l，搅拌，缓慢滴加50%硫酸100ml左右，调pH为2.0～2.4，加热使温度达70～75℃，保温10min，速冷到20℃以下，加入硅藻土（用0.5mol/L调pH，加热至70～75℃，保温5min，速冷到20℃以下，加入硅藻土200g助滤，滤液于低温保存。残渣再用0.5mol/L醋酸2l洗涤，过滤。合并3次滤液，用10%氢氧化钠pH3.1～3.4，先用布氏漏斗过滤，再用4号垂熔玻璃漏斗过滤，至滤液澄清为止，滤液送冷室放置过夜。

促性腺激素的制备

工艺过程：

   全激素提取  前叶干粉1kg，加10l提取溶剂（10%醋酸铵溶液6l加95%4l乙醇，用醋酸钠调pH5.1）搅拌提取3～10h，过滤，残渣用5l上述溶剂再抽提1次，两次滤液合并，在搅拌下慢慢加入-10～-15℃的95%乙醇至醇浓度达76～80%；于40℃以下放置二天，第三天抽滤 ，将沉淀压干，用冷的95%乙醇洗1次，冷乙醚洗2次，抽干后立即真空干躁，得到白色全激素干粉（收率6～7%）。

   LH-FSH分离  取全激素粉50g，溶于1l0.1mol/L硫酸铵溶液中，加硫酸铵至1.25mol/L，离心去沉淀，上清液用2mol/L氢氧化钠调pH7.2～7.5，在搅拌下缓缓加硫酸铵至2.0mol/L，离心，清液为FSH，沉淀为LH。

   LH 上述沉淀溶于10倍量蒸馏水（pH7.4～7.5）中，用新配制的5%偏磷酸调pH4.2，除去催乳激素等沉淀，及时将上清液调pH7.4～7.5，加硫酸铵到3.0mol/L，静置过夜。次日离心收集沉淀，按湿重溶于1～1.5倍蒸馏水（W/V），置于透析袋中透析除去硫酸根。取样测定效价，透析液-20℃冷冻保存，为LH半成品。

   FSH 上述清液用2mol/L盐酸调pH5.0，补加硫酸铵至3.6mol/L，静置过夜，次日离心，收集沉淀，按湿重溶于1～1.5倍蒸馏水中，透析除去硫酸根、取样测定效价，透析液-20℃冷冻保存，为FSH半成品。

按上述工艺制备的LH和FSH，效价为20～30U/mg，如低于10U/mg应再进行盐析分离一次。

从长须鲸（Balaenoptera physalus)胃粘膜提取胃泌素 

胃粘膜

 ↓煮30min过滤

水滤物

 ↓等电点沉淀(醋酸,Ph4.0)

沉淀

 ↓溶于氢氧化铵(ph10.0),加异丙醇及磷酸氢二钾

溶液

 ↓加乙醚

水层

 │DEAE-纤维素吸附,0.1mol/L氢氧化钠洗脱,

 ↓等电点沉淀

沉淀

 ↓冻干

胃泌素

　   胃泌素的生物测定是根据猫或大鼠胃酸排出量计算，以组胺作参考指标，故活性是以组胺单位（HU）/mg表示。