蛋白质多肽激素的提取1

下，hGG只存在于妊娠母体和胎儿血液中，初孕阶段hGG功能是维持黄体，刺激黄体细胞产生黄体酮，使子宫内膜不破裂，保证受精卵着床。受精后2-3周，即可在尿中测得hGG，以后含量迅速增加，末次月经后70天达最高峰，每日尿中含hGG4-20万IU，90天后又迅速下降至每日5-10000IU，直至分娩都在维持在这个水平。

    绒促性素主要具有类似的黄体生成素（LH）的作用。促使月经黄体转变为妊娠黄体分泌雌激素和孕激素。还可刺激胎盘产生孕激素和雌激素。也具有卵泡刺素（FSH）样作用。但较弱。可能LH样作用与β亚单位有磁。抑制垂体促性腺激素的合成与释放，可牟是妊娠中抑制排卵机制之一。

    近年发现具有内在的FSH和TSH活性，以及免疫抑制作用。意味着hGG生理功能远比目前知道的要复杂的多。特别hGG的免疫抑制作用，可能具有重要的生物学意义。妊娠期母体免疫反应能力降低，对胎儿不发生排斥，可能与这种免疫抑制作用有关。

    促绒性素可用于治疗习惯性流产，或用于由于FSH过多、LH不足引起的不际症、性机能障碍（阳萎、隐睾）以及侏儒症等。也用于由于制备妊娠试剂或放射免疫试剂，用以测定血、尿中hGG含量，诊断早期妊娠或绒毛膜癌。近年来一些工作表明，早在受精后7-9天，便可右血液中测出hGG的测出hGG。hGG可能作为一种受孕的信号。早孕和滋养层细胞肿瘤以外还发现一些非滋养层细胞肿瘤可用hGG来诊断。如用放射性受体测定法诊断闭经、流产、异位妊娠、多胎妊娠、滋养叶疾病，排卵期确定及阐明宫内避孕机制等均有较好的效果。因此hGG的检测也可能成为肿瘤诊断和治疗的监视手段。在畜牧业中，可用来治疗由于牲畜卵泡囊肿而引起的不孕症，提高难配牲畜的受胎率，使牲畜同步发情，便于同龄饲养，有利于集体饲养以及家鱼催情。

绒毛膜促乳素（Choriomamonotropin,hCS）

    人胎盘合体滋养层细胞分泌一种类似垂体GH及PRL的蛋白质激素。它从胎盘组织释放到血液中，然后从尿中排出。猴的绒毛膜促乳素与人的hCS极接近。各种哺乳动物（如牛、羊、马、猪、兔和鼠类）均存在绒毛膜促乳素物质，其中牛、羊的已被分离。

生理活性及应用

    该激素具有多种多样的生理功能。如促生长发育，促肝糖元合成及肌蛋白合成，促乳腺生成和泌乳，促黄体、促红细胞生成，刺激醛固酮分汤以及促脂解作用等。总之它对机体的合成代谢具有重要作用。显然它兼有垂体GH及PRL的活性，但其促生长活性只有GH的30%。在晚孕妇女血浆中绒毛膜促乳素的浓度较GH高1000倍。近年发现它与hGG一样对植物凝集诱导的淋巴细胞转型具有抑制作用。这表明通过这种方式可抑制细胞调节的免疫性，这可能与母体对成长胎儿不产生免疫排斥有关。绒毛膜促乳素在整个妊娠期的分泌曲线与胎儿的重量完全平行。

    此激素在绒毛膜中合成之后经24h才释放出来。每g胎盘湿重约含300μg绒毛膜促乳素。妊娠末期胎盘每天分泌近300mg的此激素，在血浆中浓度达10μg/ml，但生物半衰期很短，在19-30min之间。它在血液中的浓度之高，更新率之快，远远超过了任何一种蛋白质和多肽激素。

    绒毛膜促乳素来源较垂体GH容易得多。因此，许多研究者探索用它代替GH治疗垂体侏儒症。它能精确反映整个妊娠期母体胎盘的功能状态。自发性流产、葡萄胎、绒毛膜癌、妊娠血毒症及妊娠期延长等，所有这些病变此激素均低于正常。所以对此激素的免疫测定在国外常用于临床诊断。

绒毛膜促甲状原激素（Chorionic thyrotropin hCT）

    该激素从胎盘中分出。垂体TSH的抗体不能（或只能部分）中hCT的生物活性，说明两者为不同的激素。

    人体产生促甲状腺的活性物质还有许多种，特别是在病理条件下，例如葡萄胎和绒毛膜癌患者，胎盘还产生大量的葡萄胎促甲状腺素（Molar thyrotropin,hMT它可能是这类病人甲状腺功能异常的原因。hMT分子量为65000，作用时间较长，不与垂体TSH反应。甲状腺病毒症的某些患者血清中含有长效促甲状腺因子（Long-acting thyroid stimalator,LATS），其结构又与TSH、hCT和hMT不同，它是一种免疫球蛋白G，甲状腺机能亢进可能与其有密切关系。

尿激酶

    自Mactarlane (1947) 发现尿中有溶解凝血作用的物质之后，1952年Sobel对该物质进行了研究，并命名为尿激酶。UK是由肾细胞产生的一种纤维蛋白溶酶原激法剂。属一种碱性蛋白质的丝氨酸酯酶。有多种分子量形式，主要有31300及54700。存在于人及哺乳动物尿中。鲜尿中几乎是大分子量尿激酶（HUK），小分子量尿激酶（L-UK）是其降解产物。人尿中UK平均含量5～6IU/ml。也可由肾细胞培养法制取L-UK。临床实践表明，H-UK治疗血栓症的效果比L-UK好。动力学研究也证明，H-UK激活其天然底物溶纤酶原（PG）的米氏常数（Km）仅为L-UK的一半。

    通过Sephadex G-100、Sephadex G-75、SP-Sephadex C-50系列柱层析，纯化的人尿尿激酶分为两种活性形式。它们在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶梯度电泳及Ouchterlony's双向免疫扩散法皆呈均一组成（pI为8.7、8.9、9.1、9.2、9.4)，L-UK也有同样数目的亚形式（pI7.5、8.3、8.8、9.4、9.7)。具有最高比活的H-UK亚形式PI为9.4，L-UK亚形式为pI8.3及8.8。有人认为精制后的UK亚形式不符合体内的形式，是精制过程中的赝象。

催产素的制备

    制备原理  催产素和加压素含有相同数目的氨基酸残基。但两者的等电点不同，催产素的pI为7.7，加压素的pI为10.9，即加压素碱性较强。将提取液通过人造沸石柱时，由于加压素容易成为带正电的离子而被吸附，催产素则大部分通过柱流出，从而达到初步分离。流出的催产素溶液，可用皂土处理进一步使两种激素分离。

工艺过程：

    提取  后叶干粉100g，石英粉约30g，加入蒸馏水1.4l，于球磨机中球磨提取45min，离心，收集液体，残渣再分别加水1.4l、1.3l、1.3l按同法提取3次，合并4次离心液。

    层析分离  取已处理好的人造沸石1500g，加入0.25%醋酸溶液20L，搅拌后倾入交换柱中，待交换柱中0.25%醋酸液液面下降到沸石表面时，立即续加蒸馏水，待浑浊液流尽后停止收集。流经沸石的提取液用冰醋酸调节pH值，水浴迅速加热至95℃保持3min，立即冷却，送入冰箱过夜。

    皂土吸附  将药液过滤得澄清液。皂土吸附有两种方法：①滤液在搅拌下加入事先处理好的10%皂土浆（一般每100ml加3ml)，连续搅拌1h，离心，上清液应检查吸附是否完全（用磺基水