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酶的提取与制备2

减小字体 增大字体 作者:佚名  来源:本站整理  发布时间:2007-12-22 1:30:12
无时无刻地产生O2-·,但由于细胞内存在一种高效的“清除剂”——SOD,因此生物体仍能维持正常的生理功能。在病理的情况下能否通过补充外源的SOD达到防病治病的效果这是大家所关注的,虽然这方面报道较多,但大多数仅处在动物试验阶段。

    生物体内不少病理过程都能产生超氧离子。首先应了解超氧离子在各种氧-氧键中的地位,氧-氧键共有4种。

    超氧离子的产生  超氧离子对人体的毒性很大,对细胞的破坏力极强。不少疾病对人体的致命性,产生超氧化物也是原因之一。以下几方面能产生超氧离子:

  发炎  不少炎症已证实能产生超氧离子,如类风湿性关节炎、骨关节炎、腿部水肿等。肺炎、肺水肿由于处于富氧的肺部,更易产生超氧离子。

  电离辐谢  机体经电离辐射后会产生有毒的超氧离子,这是辐照病(放射病)的致命原因之一。

    据Pethan等人报道,SOD可提高辐照动物的存活率,Huber等人报道每天注射2mg/kg的SOD可降低自身免疫鼠的抗体滴度;Robbins等人报到每天静注105μg/g可抵抗由SOD抑制剂链脲佐菌素所引起鼠的糖尿病;Leuthauser和Larry等人初步证明无论单次静注或肌注SOD,均能延长患有腹水癌鼠的寿命。

    超氧化物歧化酶近年来在国际上受到广泛的重视,这是因为它可以作为治疗酶,对不少较为难治的病有一定的疗效。国外从牛红细胞中制得的超氧化物歧化酶。其商品名为Orgotein。不少人研究Orgotein的药理性质,证明它无毒,无抗原性,能抗发炎、抗超氧离子、抗病毒感染。作为治疗酶的超氧化物歧化酶有以下功能。

    对自身免疫性疾病的治疗作用  SOD对自身免疫性疾病一般均有疗效。例如Crohn's疾病也称回肠结肠炎。这是一种肠道自身免疫性疾病,极为顽固。但有不少例子说明经过每天500mg剂量的SOD处理(皮下注射)2个月内症状消失。

    胶原性的自身免疫性疾病即所谓胶原病,例如红斑狼疮、皮肌炎、类风湿性关节炎等,以前都没有有效的治疗方法,现在用SOD处理,均可获得缓解和治愈。在各类胶原性疾病中,包括硬化(Sclerosis)、红斑狼疮、类风湿性关节炎、皮肌炎以及结节性动脉外膜炎等的细胞中,均可发生染色体断裂,这与疾病产生的超氧离子有关。实验证明,超氧离子不但可引起染色体断裂,还可造成染色体重组,引起严重恶果。但经过一个阶段的SOD治疗,染色体断裂现象消失。

    对其他炎症及水肿的疗效  SOD对肺炎有特效。因为肺经常充满氧气,因而患有细菌性肺炎时,就更易产生超氧离子。肺因而受到侵害。如用SOD静注处理,可得预期的效果。些外SOD对各类过敏性引起的水肿——如抗血清引起的皮肤水肿,角叉菜聚糖(Carraeggnan)引起的脚部水肿以及其他炎症性水肿均有一定疗效。对各类细菌引起的发炎也有很好疗效。

    辐射产生的O2-·及OH·作用于细胞膜,使细胞膜的脂类物质发生过氧化反应,则改变了膜的结构和离子的通透性,使大量K+外流,导致细胞的溶血破裂。有人证明,腺粒体膜的脂质过氧化是由Fe3+、ADP及O2-·的作用造成的。微粒体膜的脂质过氧化主要是与O2-·的作用有关。所以在生物体遭受辐射时,SOD具有保护机体的作用。

    已经发现放射病患者的染色体有断裂现象,从这一点看,其起因与胶原病患者相同。

    对放射病的疗效  经受高剂量X-射线或γ-射线照射所得的放射病,一直苦于没有好方法治疗。放射病引起的致命症状,多半是超氧离子造成的。SOD对各类放射均有较好的疗效,SOD并可在临床实践中用作治疗性辐射的预防保护剂。

    人体白细胞对外部入侵的细菌吞噬时能产生微量的超氧离子杀死病菌,剩余的有毒超氧离子被人体的超氧化物歧化酶分解,而不会损害机体。

    肿瘤SOD含量异常,在动物细胞中Mn-SOD常用较大的下降,而人体肿瘤中其含量仅稍低于正常组织。有人认为干扰素充分发挥抗病毒作用需有SOD的存在。

    SOD可作为皮肤化妆品使用,防止皮肤色素形成和沉着,有使皮肤色素分解及退色的效果。与还原物质合用有加成效果。

  有人发现,防御氧代谢毒害作用愈强的动物生命愈长。

    作为药物SOD有否毒性,这是人们十分关注的。前已提到SOD是生物大分子,分子量在3万以上,因此这就带来抗原问题。临床试验表明,SOD毒性和副作用却很小,这可能有下面3个原因:①SOD的氨基酸组成特殊,以牛血SOD为便,它约有265个氨基酸,其中将近30%是极性氨基酸,而且分子中芳香氨基酸极少,只有4%左右,加上分子十分紧密,因此SOD的溶解性也特别好。②SOD在体内代谢速度很快,有人测其在体内停留时间,发现6h只剩原注射量的10%左右,90%以上的SOD经降解而随尿排出;有人测其体内的半衰期只有6~10 min,可见SOD在体内代谢的速度是很快的。③不同来源的SOD其分子量不仅接近,而且氨基酸的顺序也有一定相似性,更有趣的是它们在免疫上相互之间存在一定的杂交性。因此一定量的外源性SOD进入体内不会严重干扰原有细胞的生理功能。迄今为止,不管SOD用于人还是用于动物,也不管何种给药方式,对人和动物的精神、睡眠、血压、心、生殖和肠胃系统的生理功能均未发现有任何副作用。

细胞色素C (细胞色素丙, Cytochrome C)

    细胞色素C是一种以铁卟啉为辅基的呼吸酶,是细胞呼吸激活剂,属于络合蛋白质。由多肽与血色素络合而成。血色素是铁的衍生物,具氧化还原的可逆性,从而导致细胞色素α能在生理氧化反应过程中表现出电子传导,即Fe2+Fe3+的效能,以促进细胞的氧化反应,达到兴奋呼吸目的。它在生物氧化过程中,是一个非常重要的电子传递体。马心是常用的提取原料。猪、牛、羊、兔心均含此酶,鲐鱼肉含0.0138%,鲐鱼心含0.0018%。鲨心及骆驼心均含有。

活性及应用

    细胞色素C是有效的电子传递体,对因组织缺氧引起的一系列症状,起到矫正细胞呼吸与物质代谢作用。

    临床上细胞色素C主要用于治疗因组织氧化还原过程障碍及因组织缺氧所引起的一系列疾病,如改善脑血管障碍、脑出血、脑外伤、脑动脉硬化、脑栓塞、中风后遗症等引起的氧缺乏诸症状;治疗一氧化碳中毒、催眠剂中毒、新生儿假死、视神经症以及因心脏代谢障碍、心绞痛引起的心肌组织缺氧等。也可应用细胞色素C治疗因支气管哮喘和慢性肺炎所致的肺功能不全。有报道对进行性肌肉萎缩症也显较好疗效。其肠溶衣口服片对放疗和化疗引起

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