氨基酸提取与制备

    L-胱氨酸粗制  粗品用2mol/L盐酸加热搅拌溶解，升温至90℃立即加入适量的活性碳，搅拌20～30min，趁热减压过滤，滤饼用少量2mol/L盐酸洗涤数次，合并滤液和洗涤液，先用碱中和，控制温度，调ph1.5，改用饱和碳酸钠中和至ph4.8～5.0。温度控制在前72～74℃，趁热减压过滤得半成品（浅灰白色，有时为白色）

  L-胱氨酸精制  于1mol/L盐酸中加入半成品，加热搅拌溶解。加热至70～75℃，升温至90℃加一定量的活性碳。搅拌20～30min，趁热过滤，滤液加热至70～75℃，用饱和碳酸钠和至pH1.5～2.0，有L-胱氨酸析出，减慢搅拌速度，继续加碳酸钠，严格控制pH3.5～4.0，迅即趁热减压过滤，L-胱氨酸白色结晶用热去离子水洗至Cl^-，于60～80℃烘干即得成品。

    注：由于提高温度可使一种溶质吸附增加，而同时又使存在于同一溶液中另一些溶质的吸附减少，故先将脱色液加热至90℃后再加碳，使吸附大分子色素，其次也吸附小分子氨基酸，可使胱氨酸收率增加。

    由于L-胱氨解长时间水解易旋化，故宜短时间强热水解。碳易吸附胱氨酸，用过的碳应充分洗净。胱氨酸遇碱易分解，中和沉淀时应注意pH。此外，胱氨酸与脯氨酸等电点接近，如沉淀时间长两者可混晶析出。可利用两者在盐酸中的析出量因盐酸.浓度不同而异的性质进行分离。

酪蛋白水解液中分离亮氨酸

    取酪蛋白500g加20%盐酸1360ml，煮沸16h，反复减压浓缩除去过剩的盐酸，将残留物溶于2l的热水中，加12mol/L氢化钠190ml，使pH为2.4，溶液内加碳60g，煮沸几分钟，脱色，过滤，洗净，将滤液及洗液合并，冷却过后，滤除析出的酪氨酸，滤液减压浓缩至900ml，放置一夜，将析出的二亮氨酸盐酸盐与氯化钠的混合沉淀物过滤，用25%食盐水300ml洗净，将此粗产物溶于600ml温水中，碳脱色后用氢氧化钠溶液中和至甲基红中性，滤取第1次结晶，水洗，将滤液及洗液合并浓缩至约200ml，得第2次结晶，合并两次结晶共得34.5g。取此粗亮氨酸用70%甲醇4l加热溶解，碳脱色，冷却，过滤，结晶用70%甲醇洗，得膏氨酸28.1g(mp314～315℃)。

从天然蛋白质水解液的亮氨酸组分分离亮氨酸

    水解  取鱼片下脚料2kg、工业盐酸5.4l、水1.8l，装入水解瓶内进行水解。水解条件：温度106～110℃,盐酸浓度约6mol/L，时间20h。水解完毕水解液呈红棕色。

    中和脱色  将水解液搅拌冷却，缓缓加入7mol/L碱液，中和终点控制在pH3，分别加入上批重结晶用废碳和新碳，进行2次脱色，新碳加量每批400g(约2%)，搅拌70～80℃保温脱色30min，过滤，脱色液为略带黄色的透明液体。

    浓缩结晶  将水解液用稀盐酸调pH2.5，然后减压浓缩，待有大量氯化钠结晶析出时，抽滤，滤液用浓缩，直至总体积为2～3l为止，抽滤，合并滤饼（氯化钠和亮氨酸混合结晶）。

    酸溶沉淀  将上步浓缩结晶物加3mol/L盐酸1.5l，加热搅拌，70～80℃保温0.5h，抽滤弃去氯化钠结晶，滤液为亮氨酸盐酸盐溶液，体积约2.6l，然后按酸溶液体积10%比例，边搅边缓缓加沉淀剂，使亮氨酸和沉淀剂结合成盐，沉淀、分离、滤液按同样方式操作，直到最后滤液加入沉淀剂无沉淀析出为止，合并滤饼，用少量蒸馏水调匀，抽滤，如此操作两次，得白色亮氨酸磺酸盐。

    氨解  将得到的亮氨酸磺酸盐，用7mol/L氨水中和，终点控制在pH6～8，70～80℃保温搅拌1h，静置冷却分层，抽滤，滤饼用少量蒸馏水搅匀，抽滤2次，得白色亮氨酸粗品。

    重结晶  按重量比1：40加蒸馏水，将亮氨酸粗品加热溶解，加1%碳脱色，脱色液经色度和澄清度检查合格后进行减压浓缩，直至体积为原液的四分之一为止，有大量的白色片状结晶析出，搅拌，自然冷却至室温，抽滤，得亮氨酸结晶，母液脱色后再浓缩结晶，合并2次结晶，干燥后得亮氨酸成品。

从亮氨酸及异亮氨酸混合注解中分离氨基酸

    取96g硫酸铜（5H₂O）加于含80g亮氨酸及20g异亮氨酸的1,000g水溶液中，用50%硫酸液调pH为1.5，加30%氢氧化钠液得蓝色透明液。调pH2.5，滤得87g亮氨酸铜（Cu(Leu)2)结晶。滤液加30%氢氧化钠液调pH7，滤得33g50%亮氨酸铜及50%异亮氨酸铜（Cu(Leu)2)混合物。加20ml水及50%硫酸液，得pH1.5的第2份蓝色透明液。加30%氢氧化钠液调pH为3，滤得80%亮氨酸铜及20%异亮氨酸铜混合物19g。加30%氢氧化钠调pH为7，滤得15%亮氨酸铜及85%异亮氨酸铜12g(以上%数系指纯度）。

    取87g氢氧化铜及12g异亮氨酸铜按下法分离铜：取300份亮氨酸铜或异亮氨酸铜与400份25%氢氧化钠液的混合物，85℃保温1h，搅拌后滤得氧化铜，用浓盐酸中和滤液，滤得氨基酸。

从猪血粉中系统分离缬氨酸、亮氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸

    水解  猪血粉400kg加阳离子交换水400l，搅匀，浸2h以上，投入水解池，加入盐酸（约10mol)800l，温度保持在110～115℃水解22h，停止加热，降温2h，加水至原体积，出料。按水解液1份加水1份稀释，加温至沸，趁热过滤。

    交换  滤液1份加水4份再稀释备交换用。于2700×600mm3支交换柱中各柱装入001树脂600l。于2700×400mm 1支柱中装入001树脂200l。于另1支2,000×250mm柱中装入001树脂90l。均预先处理成H⁺型使用。控制交换液的pH值在氨基酸的等电点以下。如pH为1.5～2.0，流速1000ml/min，顺流树脂柱，二柱串联。当第1根柱交换至流出液有缬氨酸穿漏时，串入第2根柱，停止交换。交换毕，两柱串起来，水洗到无色素流出为止。

    分离  洗脱剂可为0.2mol/L氢氧化铵、2mol/L氢氧化铵、0.2mol/L氯化铵、0.1mol/L氨-氯化铵。流速：

2700×600mm柱为500ml/min(11.1cm/h)，2700×600mm柱400ml/min(8.8cm/h)，2700×400mm柱300ml/min（15cm/h)。分离方式为柱串联。

    水洗完毕将3柱串联用0.1mol/L氨-氯化铵，以500ml/min(11.1cm/h)的速度顺次流过3柱。第1根柱流出液中无亮氨酸时，拆开第1柱。

    第1根柱继续用0.1mol/L氨-氯化铵改用400ml/min(8.8cm/h)流速洗脱组氨酸，分部收集，至无Pauly反应时止。继而洗脱赖氨酸。当柱流出液中有坂口反应时水洗至无Cl^-，先用0.2mol/L氢氧化铵后用2mol/L氢氧化铵洗脱精氨酸。

    第2、3根柱继续用0.1mol/L氨-氯化铵，以500ml/min（11.1cm/h)流速洗脱至第2柱底部视孔有酪氨酸结晶析出时，拆开第2柱。

    第2根柱继续用0.1mol/L氨-氯化铵，改用400ml/mi